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關于液相色譜填料固定相的選擇方法

更新時間:2022-06-14      點擊次數:923
   液相色譜填料常是以硅膠為基質,表面鍵合有極性相對較弱的官能團的鍵合相。反相色譜所使用的流動相極性較強,通常為水、緩沖液與乙腈等的混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強的組份先被沖洗出,而極性弱的組份會在色譜柱上有更強的保留。
  液相色譜填料是液相色譜技術的核心關鍵,應用領域廣泛,并對分離純化的結果和效率起著至關重要的作用,生產環節下游需通過分離純化提高產品的純度和收率,保障產品質量和穩定性;色譜/層析技術是實現分離純化的主要方式,而色譜填料/層析介質及其工藝恰恰是影響色譜/層析效率重要的因素。
 
  液相色譜填料固定相的選擇:
  (1)分離中等極性和極性較強的化合物可選擇極性鍵合相。
  氰基鍵合相對雙鍵異構體或含雙鍵數不等的環狀化合物的分離有較好的選擇性。
 
  氨基鍵合相具有較強的氫鍵結合能力,對某些多官能團化合物如甾體、強心甙等有較好的分離能力;氨基鍵合相上的氨基能與糖類分子中的羥基產生選擇性相互作用,故被廣泛用于糖類的分析,但它不能用于分離羰基化合物,如甾酮、還原糖等,因為它們之間會發生反應生成Schiff堿。
 
  二醇基鍵合相適用于分離有機酸、甾體和蛋白質。
 
  (2)分離非極性和極性較弱的化合物可選擇非極性鍵合相。
  利用特殊的反相色譜技術,例如反相離子抑制技術和反相離子對色譜法等,非極性鍵合相也可用于分離離子型或可離子化的化合物。ODS是應用較為廣泛的非極性鍵合相,它對各種類型的化合物都有很強的適應能力。短鏈烷基鍵合相能用于極性化合物的分離,而苯基鍵合相適用于分離芳香化合物。
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